కరోనావైరస్ వ్యాప్తి మొదట చైనాలోని వుహాన్ నగరంలో కనిపించింది. ప్రపంచ ఆరోగ్య సంస్థ (WHO) కోవిడ్-19 వ్యాధిని మహమ్మారిగా ప్రకటించినప్పుడు ఈ వ్యాప్తి వెలుగులోకి వచ్చింది. కోవిడ్-19 అనేది SARS కోవ్ వైరస్ వల్ల వస్తుంది. మే 29, 2020 నాటికి, 5.9 మిలియన్ల మంది వైరస్ బారిన పడ్డారు, మరియు 362 వేల మందికి పైగా మరణాలు నమోదయ్యాయి. ప్రపంచంలోని అనేక దేశాలు ఈ వ్యాధి వ్యాప్తిని నియంత్రించడానికి కష్టపడుతున్నాయి.
నేటి నాటికి, ఈ వ్యాధికి చికిత్స చేయడానికి ఉపయోగించే నిర్దిష్ట ఔషధం లేదా చికిత్స లేదు. పరీక్షా విధానాల కోసం ప్రపంచవ్యాప్తంగా అనేక సిద్ధాంతాలు వర్తింపజేయబడుతున్నాయి, వైరస్ల ఉనికిని పరీక్షించడానికి విభిన్న విధానాలు వెలుగులోకి వచ్చాయి. ప్రపంచవ్యాప్తంగా వివిధ నిర్ధారణ పరీక్షలకు పెరిగిన డిమాండ్ ఉంది.
సెంటర్ ఫర్ డిసీజ్ కంట్రోల్ అండ్ ప్రివెన్షన్ (CDC) పరీక్షా పద్ధతులను రెండు వర్గాలుగా వర్గీకరించింది. ఈ పరీక్షలో వైరల్ టెస్టింగ్ మరియు యాంటీబాడీ టెస్టింగ్ పద్ధతులు ఉన్నాయి. వైరల్ టెస్టింగ్ - వైరస్ ఉనికిని గుర్తించడానికి, rt-PCR, ఐసోథర్మల్ న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ ఆంప్లిఫికేషన్, యాంటిజెన్ టెస్ట్ మొదలైన పద్ధతులు ఉన్నాయి. యాంటీబాడీ టెస్టింగ్ - ఇన్ఫెక్షన్కు రోగనిరోధక ప్రతిస్పందనగా ఉత్పత్తి చేయబడిన యాంటీబాడీలను గుర్తించడానికి.
వైరల్ టెస్ట్ :
వైరల్ టెస్ట్ పద్ధతిలో నమూనాలను సేకరించడానికి స్వాబ్ కిట్ను ఉపయోగిస్తారు. SARS కోవ్-2 వైరస్ ఉనికిని తనిఖీ చేయడానికి మీ శ్వాసకోశ వ్యవస్థ నుండి నమూనా తీసుకోబడుతుంది. పరీక్షా కిట్లను విశ్లేషణ మరియు వివరణ కోసం ప్రయోగశాలలకు పంపుతారు, ఫలితాలు రావడానికి 1-2 రోజులు పడుతుంది.
RT-PCR (రియల్ టైమ్ పాలిమరేస్ చైన్ రియాక్షన్) అనేది విస్తృతంగా ఉపయోగించబడే పద్ధతి. SARS కోవ్ వైరస్ జన్యు పదార్థంగా RNA ని కలిగి ఉంటుంది. వ్యక్తుల నుండి నమూనాలను (ఓరోఫారింజియల్/నాసోఫారింజియల్) సేకరించిన తర్వాత, RNA ని తీసి RT-PCR పరీక్ష కోసం ఉపయోగిస్తారు. RT-PCR పద్ధతి అనేది స్వయంచాలక, అధిక-థ్రూపుట్ వర్క్ఫ్లో, నమ్మకమైన పరికరాలతో కూడిన సమర్థవంతమైన సాంకేతికత, మరియు ఇది ప్రాధాన్యత కలిగిన పద్ధతిగా మారింది.
యాంటీబాడీ టెస్ట్:
యాంటీబాడీ పరీక్షలను వ్యాధి బారిన పడిన జనాభా శాతాన్ని గుర్తించడానికి ఉపయోగించవచ్చు మరియు అది రోగనిరోధక శక్తిని కలిగి ఉంటుందని భావించబడుతుంది.అయితే, యాంటీబాడీలు అభివృద్ధి అయిన తర్వాత కూడా ఒక వ్యక్తి వ్యాధికి రోగనిరోధక శక్తిని కలిగి ఉన్నాడని నిరూపించడానికి ఎటువంటి ఆధారాలు లేవు. ఈ పరీక్షలో వైరల్ ప్రోటీన్లను (SARS COV2 వైరస్ విషయంలో, స్పైక్ ప్రోటీన్) ఒక ప్లేట్పై పూయడం ఉంటుంది. సేకరించిన నమూనాలను అప్పుడు వైరల్ ప్రోటీన్పై వేస్తారు, మరియు రోగికి వైరల్ ప్రోటీన్కు యాంటీబాడీలు ఉంటే అవి బంధిస్తాయి. యాంటీబాడీ-యాంటిజెన్ బంధాన్ని అప్పుడు యాంటీబాడీల మరొక కడిగివేయడంతో గుర్తించవచ్చు, అది ఫ్లోరోసెన్స్లో కనిపించే రంగును ఉత్పత్తి చేస్తుంది.
యాంటీబాడీ పరీక్ష ప్రయోజనాలు:
- యాంటీబాడీ పరీక్ష అనేది వేగవంతమైన పద్ధతి మరియు కోవిడ్ కోసం మొదటి-లైన్ స్క్రీనింగ్గా ఉపయోగించబడుతుంది, పెద్ద ఎత్తున పరీక్ష చేయడం ద్వారా జనాభా విస్తృత స్క్రీనింగ్ను ప్రారంభించడానికి.
- ఇది వైరస్ వ్యాప్తి యొక్క నిజమైన స్థాయిని ప్రభుత్వం/సంస్థ అర్థం చేసుకోవడానికి సహాయపడుతుంది.
- ఆర్గనైజేషనల్ నిఘా సమయంలో కూడా యాంటీబాడీ పరీక్ష ఉపయోగపడుతుంది. లక్షణాలు లేని వ్యక్తులను (వైరస్ సోకిన వారు) యాంటీబాడీ పరీక్ష ద్వారా గుర్తించవచ్చు.
- యాంటీబాడీ పరీక్ష యొక్క ఇతర ప్రయోజనాలు రికవరీ ప్లాస్మా దాతల ఎంపిక (చికిత్స కోసం) మరియు వ్యాక్సిన్లకు హోస్ట్ ప్రతిస్పందనను అంచనా వేయడం.
మరిన్ని చదవండి: కోవిడ్: పరీక్షించాలా వద్దా, అదే ప్రశ్న?
ఇండియన్ కౌన్సిల్ ఆఫ్ మెడికల్ రీసెర్చ్ (ICMR) మరియు నేషనల్ ఇన్స్టిట్యూట్ ఆఫ్ వైరాలజీ (NIV) కరోనావైరస్ను గుర్తించడానికి ELISA పరీక్షను ఉపయోగించవచ్చని ప్రకటించాయి. శాస్త్రవేత్తలు SARS CoV-2 కోసం యాంటీబాడీ గుర్తింపు కోసం స్వదేశీ IgG ELISA పరీక్షను అభివృద్ధి చేశారు. ఈ యాంటీబాడీ పరీక్ష కిట్లను ముంబైలో పరీక్షించారు మరియు వాటికి అధిక సున్నితత్వం మరియు నిర్దిష్టత ఉన్నట్లు కనుగొన్నారు.
ELISA పరీక్ష అంటే ఏమిటి?
ఎన్జైమ్ లింక్డ్ ఇమ్యునోసార్బెంట్ ఎస్సే (ELISA) అనేది సెరలాజికల్ టెస్ట్ (బ్లడ్ టెస్ట్) ఆధారిత పరీక్ష, ఇది ఒక వ్యక్తికి COVID సోకిందో లేదో గుర్తించడానికి ఉపయోగించబడుతుంది. ELISA అనేది అధిక సున్నితత్వ పరీక్ష, ఇది రక్తంలో యాంటీబాడీలు, న్యూరోబయోలాజికల్ విశ్లేషణ, సైటోకైన్లు మరియు ఇతర రోగనిరోధక కణాల ఉనికిని గుర్తించి, కొలుస్తుంది.యాంటీబాడీలు శరీరంలోకి ప్రవేశించే వివిధ రోగకారక యాంటిజెన్లకు ప్రతిస్పందనగా శరీరం ఉత్పత్తి చేసే రోగనిరోధక ప్రోటీన్లు.
ELISA ఎందుకు మరియు ఇది ఇతర నిర్ధారణ పరీక్షల నుండి ఎలా భిన్నంగా ఉంటుంది?
ప్రస్తుతం ఉపయోగించబడుతున్న RT-PCR అనేది కోవిడ్ కోసం క్లినికల్ డయాగ్నోసిస్ కోసం మొదటి వరుస పద్ధతి, ఈ నిర్ధారణ వైరస్ ఉనికిని, ఏదైనా ఉంటే, ధృవీకరిస్తుంది. ఈ పరీక్ష తరువాత వ్యక్తి యొక్క ఇన్ఫెక్షన్ మరియు కోలుకోవడం గురించి నివేదించదు. నమూనాలను సేకరించడానికి నైపుణ్యం అవసరం.
యాంటీబాడీ పరీక్ష ELISA పరీక్ష యొక్క అదే ప్రాథమిక సూత్రంపై పనిచేస్తుంది. ఫలితాలు రావడానికి 2-5 గంటలు పడుతుంది. ELISA పరీక్ష జనాభాలో వ్యాధి సంభవం తెలుసుకోవడానికి సహాయపడుతుంది. ఈ పరీక్ష IgG యాంటీబాడీల ఉనికిని గుర్తిస్తుంది. IgG-ELISA SARS-CoV2 ఉనికిని గుర్తించడానికి ఇమ్యునోఫ్లోరోసెన్స్కు ఉపయోగకరమైన ప్రత్యామ్నాయాన్ని అందిస్తుంది.
ప్రపంచ ఆరోగ్య సంస్థ (WHO) ఇతర యాంటీబాడీ పరీక్షలతో పోలిస్తే అధిక సున్నితత్వం మరియు నిర్దిష్టత కారణంగా ELISA పరీక్షను సిఫార్సు చేస్తుంది. ఈ పరీక్ష ప్రత్యేకంగా నిఘా ప్రయోజనాల కోసం, ఒకేసారి పెద్ద సంఖ్యలో నమూనాలను స్క్రీన్ చేయడానికి రూపొందించబడింది.
ELISA యొక్క ప్రాథమిక సూత్రం:
ELISA పాలిస్టైరీన్ మైక్రోటైటర్ ప్లేట్లలో నిర్వహిస్తారు. ఈ ప్లేట్లలో 96 బావులు లేదా 384 బావులు ఉంటాయి. ELISA పరీక్షలో ఉపయోగించే రీజెంట్లు కదలకుండా ఉంటాయి, ఇది విధానాన్ని సులభతరం చేస్తుంది. ఈ పరీక్షలో మోనోక్లోనల్ యాంటీబాడీ కోట్ (IgM, IgG యాంటీబాడీలు ఉపయోగించబడతాయి) ఉంటుంది. అత్యంత ప్రాధాన్యత కలిగిన యాంటీబాడీ IgG, ఇది శుద్ధి చేయబడి, మైక్రోటైటర్ ప్లేట్లోని ఎంజైమ్తో బంధించినప్పుడు ఇతర ప్రోటీన్ల నుండి వచ్చే అంతరాయాన్ని నివారించడానికి సంయోగంగా ఉపయోగించబడుతుంది. రక్త నమూనాలను కలిపినప్పుడు, ప్రాథమిక యాంటీబాడీ ప్రోటీన్కు అంటుకుంటుంది.
ఒక ద్వితీయ యాంటీబాడీ ప్రోటీన్పై వేరొక ఎపిటోప్కు బంధిస్తుంది. ఈ పరీక్ష బయోటిన్తో లేబుల్ చేయబడింది, ఇది స్ట్రెప్టావిడిన్-కనియోగం చేయబడిన ఎంజైమ్ (సాధారణంగా ఉపయోగించే ఎంజైమ్లు హార్స్రాడిష్ పెరాక్సిడేస్ మరియు ఆల్కలైన్ ఫాస్ఫేటేస్) వంటి ప్రోటీన్ను తరువాత బంధించడానికి అనుమతిస్తుంది. బంధించబడని సీరం భాగాలు లేదా రీజెంట్లు ప్లేట్లను పూర్తిగా కడగడం ద్వారా తొలగించబడతాయి, PBS-T (ఫాస్ఫేట్ బఫర్డ్ సెలైన్ మరియు ట్వీన్20) సాధారణంగా ఏదైనా బంధించబడని అణువులను తొలగించడానికి డైల్యూయెంట్గా ఉపయోగించబడుతుంది.
ఒక క్రోమోజెనిక్ సబ్స్ట్రేట్ (ఎంజైమాటిక్ ప్రతిచర్య ఆధారంగా రంగును అభివృద్ధి చేస్తుంది) స్టెయిన్ను చేయడానికి ఉపయోగించబడుతుంది. టెట్రామెథైల్బెంజిడిన్ (TMB) వంటి సబ్స్ట్రేట్లు స్టెయిన్ను చేయడానికి ఉపయోగించబడతాయి. సబ్స్ట్రేట్ ఎంపిక ఎక్కువగా ఉపయోగించే పరికరం (స్పెక్ట్రోఫోటోమీటర్, ఫ్లోరోమీటర్ మరియు లూమినోమీటర్) రకంపై ఆధారపడి ఉంటుంది. ఎంజైమ్కు ఫ్లోరోసెంట్ ట్యాగ్ ఉంటుంది, ఇది సబ్స్ట్రేట్ను ఫ్లోరోమీటర్ ద్వారా గుర్తించగల ఉత్పత్తిగా మారుస్తుంది. ప్రోటీన్ల సాంద్రత తెలిసిన ప్రోటీన్ సాంద్రతల ప్రామాణిక వక్రత ద్వారా నిర్ణయించబడుతుంది. ప్రామాణికం, నియంత్రణలు మరియు నమూనాలకు సగటు శోషణ లెక్కించబడుతుంది. సగటు శోషణను Y అక్షంపై vs సాంద్రతను X అక్షంపై ప్లాట్ చేయడం ద్వారా లేదా కంప్యూటర్ సాఫ్ట్వేర్ ప్రోగ్రామ్ను ఉపయోగించడం ద్వారా ప్రామాణిక వక్రత నిర్మించబడుతుంది. ELISA ప్లేట్ రీడర్ను ఉపయోగించి వివిధ తరంగదైర్ఘ్యాల వద్ద ఆప్టికల్ సాంద్రతలను కొలవవచ్చు.
కాబట్టి ELISA ను ప్రయోగశాలలో ఎలా నిర్వహిస్తారు? ఫలితాలు ఫూల్ప్రూఫ్? సానుకూల/ప్రతికూల ఫలితం అంటే ఏమిటి? పార్ట్ 2 కోసం చూస్తూ ఉండండి - ఇక్కడ మీరు ఈ పద్ధతి వెనుక ఉన్న సైన్స్ గురించి అన్నింటినీ చదవగలరు.
మరిన్ని చదవండి: COVID-19 యాంటీబాడీ టెస్టింగ్ మరియు ELISA (పార్ట్ 2)
